液相色譜柱采用了新型的鍵合和端基封尾技術(shù)，能夠提供的色譜峰形，這較大地提高了酸、堿、中性化合物在低、中pH條件下的分離度和定量分析的準(zhǔn)確性。
 

　　較常用的液相色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠較為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等)也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑;分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑;對(duì)映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。
 

　　液相色譜柱填充劑的性能(如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團(tuán)的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類型等)以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果。孔徑在15nm(1nm=10Å)以下的填料適合于分析分子量小于2000的化合物，分子量大于2000的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm以上的填料。除另有規(guī)定外，分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm之間。粒徑更小(約2μm)的填充劑常用于填裝微徑柱(內(nèi)徑約2mm)，使用微徑柱時(shí)，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配;如有必要，色譜條件也需作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對(duì)其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時(shí)，應(yīng)以品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。
 

　　1.溫度的要求
 

　　以硅膠為載體的普通鍵合固定相的使用溫度通常不超過35℃，為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的使用溫度，但不能超過60℃。
 

　　2.流動(dòng)相的要求
 

　　流動(dòng)相的pH值應(yīng)控制在2~8之間。當(dāng)pH值大于8時(shí)，可使載體硅膠溶解;當(dāng)pH值小于2時(shí)，與硅膠相連的化學(xué)鍵合相易水解脫落。當(dāng)色譜系統(tǒng)中需使用pH值大于8的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐堿的填充劑，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠填充劑、包覆聚合物填充劑、有機(jī)-無機(jī)雜化填充劑或非硅膠填充劑等;當(dāng)需使用pH值小于2的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護(hù)作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑，或有機(jī)-無機(jī)雜化填充劑等。